我和岳m愉情xxxx国产,各种盗撮合集voyeur,av高潮喷水一区二区三区,女人做爰高潮呻吟17分钟

您好!歡迎訪問和元李記(上海)生物技術(shù)有限公司網(wǎng)站!
咨詢熱線

18616108315

當(dāng)前位置:首頁 > 新聞中心 > 高保真DNA聚合酶的使用方案

高保真DNA聚合酶的使用方案

更新時(shí)間:2018-07-23      點(diǎn)擊次數(shù):1516
  高保真DNA聚合酶可在離體條件下,以DNA為模板,延伸引物,合成雙鏈 DNA。這個(gè)酶只有5′→3′DNA聚合酶活性和 5′→3′的外切酶活性,缺少 3′→5′的外切酶活性,即具有 5’-3’DNA 聚合酶活性和對雙鏈 DNA 特異的 5’-3’外切核酸酶活性,無 3’-5’ 外切酶活性。使用該產(chǎn)品擴(kuò)增得到的 PCR 產(chǎn)物的 3’末端附有一個(gè)“A”堿基,可直接用于 TA 克隆。
由于不具有 3'-5'外切酶活性,因而在合成中對某些單核苷酸錯(cuò)配沒有校正功能。還具有非模板依賴性活性,可將PCR雙鏈產(chǎn)物的每一條鏈 3'加入單核苷酸尾,故可使PCR產(chǎn)物具有3'突出的單A核苷酸尾。另一方面,在僅有dTTP存在時(shí),它可將平端的質(zhì)粒的3'端加入單T核苷酸尾,產(chǎn)生 3'端突出的單 T 核苷酸尾。應(yīng)用這一特性,可實(shí)現(xiàn) PCR 產(chǎn)物的 T-A 克隆法。適用于,普通PCR,TA 克隆 Super Taq DNA 聚合酶 Super Taq DNA 聚合酶是由耐熱的 Taq DNA 聚合酶和具有 3’-5’外切酶活性的高保真 DNA 聚合酶按照合適的比例混合而成,具有擴(kuò)增效率高和錯(cuò)配率低的優(yōu)良性能,使用該 產(chǎn)品擴(kuò)增得到的 PCR 產(chǎn)物的 3’末端附有一個(gè)“A”堿基,可直接用于 TA 克隆。
  高保真DNA聚合酶產(chǎn)品描述,本酶為Pyrococcus furiosus中分離的pfu DNA pol基因在大腸桿菌中進(jìn)行表達(dá)后經(jīng)多步純化分離而得。Pfu DNA聚合酶具有3′→5′外 切酶(校正)活性,當(dāng)聚合反應(yīng)發(fā)生堿基錯(cuò)配時(shí),聚合酶的校正活性可將錯(cuò)配的堿基切除。Pfu DNA聚合酶為使用范圍廣的高保真DNA聚合酶,其錯(cuò)誤率僅為1.3x10-6,推薦Pfu DNA聚合酶用于需高保真的PCR反應(yīng)。產(chǎn)品用途,用于要求保真度比較高的PCR反應(yīng),包括克隆PCR、DNA片段拼接、引入突變、全基因合成,DNA片段的補(bǔ)平等(參見實(shí)驗(yàn)方案)。使用建議:Pfu DNA聚合酶產(chǎn)生的PCR產(chǎn)物為平滑末端,無3′端"A"突出,其PCR產(chǎn) 物的克隆有幾種方案。
  高保真DNA聚合酶主要特性,此酶早在大腸桿菌中發(fā)現(xiàn),以后陸續(xù)在其他原核生物及微生物中找到。這類酶的共同性質(zhì)是,以脫氧核苷酸三磷酸(dNTP)為前體催化合成DNA。需要模板和引物的存在。不能起始合成新的DNA鏈。催化dNTP加到生長中的DNA鏈的3'-OH末端。催化DNA合成的方向是5'→3'。PCR前引物進(jìn)行5′端加磷修飾或?qū)CR產(chǎn)物磷酸化處理后再直接克隆 于平滑末端的載體中(參見實(shí)驗(yàn)方案)引物中引入15bp與載體同源序列,利用 PCR產(chǎn)物一步定向無縫克隆試劑盒(Cat# NR001)直接連接到目的載體。pfu DNA聚合酶由于Pfu DNA聚合酶的校對活性可引起引物從3′端被部分降解。因此在設(shè)計(jì)引物時(shí)應(yīng)適當(dāng)增加引物的長度,理想的引物長度為20-30堿基。另外為了減少由3′→5′外切酶活性引起的引物降解,盡量在冰上配制反應(yīng)體系,并后加入Pfu酶。
微信咨詢
地址:上海市浦東新區(qū)紫萍路908弄 傳真:021-50724961
©2025 和元李記(上海)生物技術(shù)有限公司 版權(quán)所有 All Rights Reserved.  備案號:滬ICP備2023007219號-1
十八禁久久成人一区二区 | 欧美极度残忍变态另类电影| 国产美女精品一区二区三区| 女人奶水milk的hd| 啊灬啊灬啊灬快灬深视频无遮掩| 热RE99久久精品国产66热| 善良的小峓子hd完整视频中文| 国产v综合v亚洲欧美久久| 搡老熟女多毛丰满国产精品| 成人免费看的a级毛片| 老公晚上日不停我腿都酸了| 中文字幕人妻紧无码专区| 色综合久久五月色婷婷| 婷婷大伊香蕉五月天视频| 国产优优A片在线观看| 女人被强╳到高潮喷水在线观看 | a级毛片在线观看| 免费看大片软件| 久久久久精品国产三级| 国产精品麻豆成人AV电影| 蜜桃成人无码av在线观看一电影| 天干夜天干天天天爽视频| 亚洲gv钙片在线观看网站| 久久人妻无码精品一区二区三区| 亚洲色大成网站www| 国产福利一区二区三区在线| 搡老熟女多毛丰满国产精品| 欧美黑人又粗又大的性格特点| 岳两片蚌肉缓缓张开| 无码国产精成人午夜视频一区二区| 我把五十老女人弄高潮了| 天码av无码一区二区三区四区| 成熟闷骚女邻居引诱2| 少妇人妻偷人精品无码视频| 白灵大尺度人体150p| 国产V片在线播放免费无码| 国产亚洲欧美精品永久| 天天综合天天做天天综合 | 男女啪啪做爰高潮全过有多少姿势| 漂亮人妻被强了bd影片| 国产精品女人呻吟在线观看|